新獸藥注冊

中華人民共和國農(nóng)業(yè)部公告
第1747號

　　根據(jù)《獸藥管理條例》和《獸藥注冊辦法》規(guī)定，經(jīng)審查，批準江西中成藥業(yè)集團有限公司等4家單位申報的注射用黃芩等2種獸藥產(chǎn)品為新獸藥，現(xiàn)核發(fā)《新獸藥注冊證書》，并發(fā)布產(chǎn)品質(zhì)量標準、說明書和標簽，自發(fā)布之日起執(zhí)行。
　　批準青島澳蘭百特生物工程有限公司申請的雞新城疫、傳染性支氣管炎、禽流感（H9亞型）三聯(lián)滅活疫苗（La Sota株+M41株+L株）變更注冊，并發(fā)布修訂后的產(chǎn)品制造及檢驗試行規(guī)程、質(zhì)量標準、說明書和標簽，自發(fā)布之日起執(zhí)行。原農(nóng)業(yè)部發(fā)布的同品種獸藥質(zhì)量標準同時廢止。

　　特此公告。

    附件：1.新獸藥注冊目錄
          2.制造及檢驗試行規(guī)程
          3.質(zhì)量標準、說明書和標簽

　　
 
二〇一二年三月二十六日
 
 
 
 
附件1：

新獸藥注冊目錄

http://www.moa.gov.cn/govpublic/SYJ/201204/t20120406_2596312.htm

 
 
 
附件3：
注射用黃芩等3種獸藥產(chǎn)品質(zhì)量標準、說明書和標簽
 
一、注射用黃芩質(zhì)量標準、標簽和說明書
(一) 注射用黃芩質(zhì)量標準
 
注射用黃芩
Zhusheyong Huangqin
 
本品為黃芩經(jīng)加工制成的供注射用的無菌粉末。
【制法】  取黃芩8000 g，加水煎煮三次，合并煎液，濃縮，用鹽酸調(diào)節(jié)pH值至2.0，80℃保溫30分鐘，靜置12小時，濾過，沉淀物加適量水攪勻，用40%氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH值至7.0，加入等量乙醇，攪拌使溶解，濾過，濾液用鹽酸調(diào)節(jié)pH值至2.0，在80℃保溫30分鐘，靜置12小時，濾過，沉淀用乙醇洗至pH4.0，加適量水攪勻，用40%氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH值至6.0，加入0.5%活性炭，加熱微沸15分鐘，冷卻，濾過，噴霧干燥，收粉，制成無菌粉末500 g，分裝，即得。
【性狀】  本品為淡黃色至棕黃色的粉末，味淡，微苦。
【鑒別】  取本品10 mg，加甲醇10 ml使溶解，作為供試品溶液。另取黃芩苷對照品，加甲醇制成每1 ml含1 mg 的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法（附錄 32頁）試驗，吸取上述兩種溶液各 2 μl，分別點于同一聚酰胺薄膜上，以醋酸為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈（365 nm）下檢視。供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的熒光斑點。
【檢查】 pH值  取本品，加水制成每1 ml含25 mg的溶液，照pH 值測定法（附錄49頁）測定，應為5.0～7.0。
水分  不得過5.0%（附錄60頁第三法）。
蛋白質(zhì)  取本品0.5 g，加水10 ml使溶解，取1 ml，置試管中，滴加鞣酸試液 1~3滴，應不得產(chǎn)生渾濁。
鞣質(zhì)  取本品0.5 g，加水10 ml使溶解，取1 ml，依法測定（附錄73頁），應符合規(guī)定。
樹脂  取本品0.5 g，加水10 ml使溶解，取5 ml，置分液漏斗中，加三氯甲烷10ml振搖提取，分取三氯甲烷液，依法測定（附錄73頁），應符合規(guī)定。
異常毒性 取本品1支，加10 ml氯化鈉注射液使溶解，按腹腔注射法給藥，照異常毒性檢查法（附錄118頁）檢查，應符合規(guī)定。
過敏反應 取本品1支，加10 ml氯化鈉注射液使溶解，照過敏反應檢查法（附錄118頁）檢查，應符合規(guī)定。
其他  應符合注射劑項下有關的各項規(guī)定（附錄12頁）。
【含量測定】 照高效液相色譜法（附錄35頁）測定。
色譜條件與系統(tǒng)適應性試驗  用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；甲醇－水－磷酸（50 : 50 : 0.3）為流動相；檢測波長276  nm。理論板數(shù)按黃芩苷峰計算應不低于1000。
對照品溶液的制備  精密稱取黃芩苷對照品，加甲醇制成每1 ml含20 μg的溶液，作為對照品溶液。
供試品溶液的制備  取本品約40 mg，精密稱定，置100 ml量瓶中，加甲醇使溶解并稀釋至刻度，搖勻。精密量取2 ml，置25 ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，即得。
測定法  分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10 μl，注入液相色譜儀，測定，即得。
本品每支含黃芩以黃芩苷(C₂₁H₁₈O₁₁)計，不得少于375.0 mg。
【功能】 清熱燥濕，瀉火解毒。
【主治】 咳喘證，用于緩解雞傳染性支氣管炎引起的呼吸道癥狀。
【用法與用量】 肌內(nèi)注射：一次量，雞，10~20 mg，一日2次，連用3日。臨用前以10 ml注射用水充分溶解。
【規(guī)格】 每支裝0.5 g。
【貯藏】 密封，置陰涼干燥處。
【有效期】 2年
 
（二）注射用黃芩標簽
 
獸  用
【獸藥名稱】
通用名：注射用黃芩
商品名：
漢語拼音：Zhusheyong Huangqin
【性狀】  本品為淡黃色至棕黃色的粉末，味淡，微苦。
【功能與主治】  清熱燥濕，瀉火解毒。主治咳喘證，用于緩解雞傳染性支氣管炎引起的呼吸道癥狀。
【用法與用量】  肌內(nèi)注射：一次量，雞，10~20 mg，一日2次，連用3日。臨用前以10 ml注射用水充分溶解。
【規(guī)格】  每支裝0.5 g。
【包裝】 
【貯藏】  密封，置陰涼干燥處。
【有效期】  2年。
【生產(chǎn)企業(yè)】  
 
（三）注射用黃芩說明書
 
獸  用
【獸藥名稱】
通用名： 注射用黃芩
商品名：
漢語拼音：Zhusheyong Huangqin
【主要成分】  黃芩。
【性狀】  本品為淡黃色至棕黃色的粉末，味淡，微苦。
【功能與主治】  清熱燥濕，瀉火解毒。主治咳喘證，用于緩解雞傳染性支氣管炎引起的呼吸道癥狀。
【用法與用量】  肌內(nèi)注射：一次量，雞，10~20 mg，一日2次，連用3日。臨用前以10 ml注射用水充分溶解。
【不良反應】  尚未見不良反應。
【規(guī)格】  每支裝0.5 g。
【包裝】 
【貯藏】  密封，置陰涼干燥處。
【有效期】 2年。
【生產(chǎn)企業(yè)】
 
二、苦參蒼術口服液質(zhì)量標準、標簽和說明書
(一) 苦參蒼術口服液質(zhì)量標準
 
苦參蒼術口服液
Kushen Cangzhu Koufuye
 
【處方】 蒼術1160 g         苦參2500 g
【制法】 以上2味，蒼術加水蒸餾，收集蒸餾液，4℃冷藏，分離油層，得蒼術揮發(fā)油，備用?？鄥⒓铀逯蠖?，每次2小時，合并煎液，濾過，濃縮至相對密度1.10～1.20（70℃），用75%乙醇沉淀，4℃靜置過夜，濾過，回收乙醇，加水至每1 ml含生藥約1.5 g，用20%氫氧化鈉溶液調(diào)pH值至9~11，用三氯甲烷提取三次，合并三氯甲烷液，濾過，回收溶劑至無三氯甲烷氣味，得浸膏，備用。蒼術揮發(fā)油加入30 g吐溫-80，攪拌均勻，加30%乙醇200 ml溶解，苦參浸膏加30%乙醇300 ml溶解，以上溶液混合均勻，調(diào)pH值至5.0～7.5，加入苯甲酸鈉2 g，加水至1000 ml，混勻，滅菌，灌裝，即得。
【性狀】 本品為棕黃色液體；氣特異，味辛、苦。
【鑒別】 （1）取本品1 ml，加水9 ml，用正己烷提取三次，每次10 ml，合并正己烷液，揮干，殘渣加正己烷2 ml使溶解，作為供試品溶液。另取蒼術對照藥材0.5 g，加正己烷2 ml，超聲處理15分鐘，濾過，濾液作為對照藥材溶液。照薄層色譜法（附錄32頁）試驗，吸取上述兩種溶液各2~6 μl， 分別點于同一硅膠G薄層板上，以石油醚（60~90℃）－乙酸乙酯（20︰1）為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5％ 對二甲氨基苯甲醛的10％硫酸乙醇溶液，加熱至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，應顯相同的污綠色主斑點（蒼術素）。
（2）取本品1 ml，加水9 ml混勻，加濃氨試液調(diào)節(jié)pH至11，用三氯甲烷振搖提取三次，每次10 ml，合并三氯甲烷液，蒸干，殘渣加三氯甲烷10 ml使溶解，作為供試品溶液。另取苦參堿對照品，加三氯甲烷制成每1 ml含0.2 mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法（附錄32頁試驗，吸取上述兩種溶液各2~4 μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以甲苯－丙酮－甲醇(16︰6︰1)為展開劑，置氨蒸氣預飽和的展開缸內(nèi)，展開，取出，晾干，噴以改良碘化鉍鉀試液。供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，應顯相同顏色的斑點。
【檢查】pH值  應為5.5～7.5（附錄49頁）。
相對密度  應為0.90～1.05（附錄45頁）。
三氯甲烷  照溶劑殘留測定法（一部附錄81頁）測定，不得過0.006%。
色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗  極性色譜柱，DB-FFAP毛細管柱（30 m× 0.53 mm，膜厚1 μm）；進樣口溫度：220℃；柱溫：程序升溫，40℃保持10分鐘后，以10℃/min的速率升溫至70℃，保持3分鐘，再以20℃/min的速率升溫至200℃；FID檢測器溫度250℃；載氣為氮氣，流速3.0 ml/min；分流比1 : 1；進樣方式：直接進樣。理論板數(shù)按三氯甲烷峰計算應不低于1500。
測定法  精密稱取三氯甲烷對照品適量，用DMF稀釋制成60 μg/ml的溶液，做為對照品溶液。直接取供試品做為供試品溶液。分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各1 μl，注入氣相色譜儀，記錄色譜圖。供試品溶液色譜圖中如有三氯甲烷峰，峰面積不得大于對照溶液主峰面積。
其他  應符合合劑項下有關的各項規(guī)定（附錄10頁）。
【含量測定】 照高效液相色譜法（附錄35頁）測定。
色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗  以氨基鍵合硅膠為填充劑；以乙腈-無水乙醇-3％磷酸溶液（80︰10︰10）為流動相；檢測波長為220 nm。理論板數(shù)按苦參堿峰計算應不低于1500。
對照品溶液的制備  精密稱取苦參堿對照品適量，加乙腈-無水乙醇（80︰20）溶解，制成每1 ml含50 μg的溶液，即得。
供試品溶液的制備  精密量取本品5 ml，置50 ml量瓶中，加乙腈-無水乙醇（80︰20）溶解，稀釋至刻度，搖勻，再精密量取5 ml，置50 ml量瓶中，加乙腈-無水乙醇（80︰20）溶解，稀釋至刻度，搖勻，即得。
測定法  分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10 μl，注入液相色譜儀，測定，即得。
本品每1 ml含苦參以苦參堿（C₁₅H₂₄N₂O）計，不得少于4.0 mg。
【功能】 清熱，燥濕，止痢。
【主治】 雞大腸桿菌病。
【用法與用量】 每1 L水，雞，1 ml，連用3～5日。
【規(guī)格】 每1 ml相當于原生藥3.66 g。
【貯藏】 密封，避光。
【有效期】 2年
【生產(chǎn)企業(yè)】
 
（二）苦參蒼術口服液說明書
獸  用
【獸藥名稱】
通用名： 苦參蒼術口服液
商品名：
漢語拼音：Kushen Cangzhu Koufuye
【主要成分】  蒼術、苦參。
【性狀】  本品為棕黃色液體；氣特異，味辛、苦。
【功能與主治】  清熱，燥濕，止痢。主治雞大腸桿菌病。
【用法與用量】  每1 L水，雞，1 ml，連用3~5日。
【不良反應】  尚未見不良反應。
【規(guī)格】  每1 ml相當于原生藥3.66 g。
【包裝】 
【貯藏】  密封，避光。
【有效期】 2年。
【生產(chǎn)企業(yè)】
 
（三）苦參蒼術口服液標簽
 
獸  用
【獸藥名稱】
通用名： 苦參蒼術口服液
商品名：
漢語拼音：Kushen Cangzhu Koufuye
【性狀】  本品為棕黃色液體；氣特異，味辛、苦。
【功能與主治】  清熱，燥濕，止痢。主治雞大腸桿菌病。
【用法與用量】  每1 L水，雞，1 ml，連用3~5日。
【規(guī)格】  每1 ml相當于原生藥3.66 g。
【包裝】 
【貯藏】  密封，避光。
【有效期至】 
【生產(chǎn)日期】
【生產(chǎn)企業(yè)】
三、雞新城疫、傳染性支氣管炎、禽流感（H9亞型）三聯(lián)滅活疫苗（La Sota株+M41株+L株）質(zhì)量標準、說明書和內(nèi)包裝標簽
（一）雞新城疫、傳染性支氣管炎、禽流感（H9亞型）三聯(lián)滅活疫苗（La Sota株+M41株+L株）質(zhì)量標準
 
雞新城疫、傳染性支氣管炎、禽流感（H9亞型）三聯(lián)滅活疫苗（La Sota株+M41株+L株）
Jixinchengyi、Chuanranxingzhiqiguanyan、qinliugan（H9 yaxing）
Sanlianmiehuoyimiao（La Sota zhu+M41 zhu+L zhu)
Newcastle Disease,Infectious Bronchitis and Avain Influenza （Subtype H9） Vaccine,Inactivated（Strain La Sota + Strain M41 +Strain L)
 
本品系用雞新城疫病毒La Sota株、雞傳染性支氣管炎病毒M41株和A型禽流感病毒A/Chicken/Shandong/1/2002（H9N2）株（簡稱L株）分別接種易感雞胚、收獲感染胚液，超濾濃縮后經(jīng)甲醛溶液滅活，與油佐劑混合乳化制成。用于預防雞新城疫、雞傳染性支氣管炎和H9亞型禽流感病毒引起的禽流感。
【性狀】外觀  乳白色乳劑。
劑型  油包水型。取一清潔吸管，吸取少量疫苗滴入冷水中，除第1滴外，均應不擴散。
穩(wěn)定性  吸取疫苗10ml加入離心管中，以3000r/min離心15分鐘，管底析出的水相應≤0.5ml。
黏度  按現(xiàn)行《中國獸藥典》附錄進行測定，應符合規(guī)定。
【裝量檢查】  按現(xiàn)行《中國獸藥典》附錄進行檢驗，應符合規(guī)定。
【無菌檢驗】  按現(xiàn)行《中國獸藥典》附錄進行檢驗，應無菌生長。
【安全檢驗】  用30～60日齡SPF雞10只，每只肌肉或頸部皮下注射疫苗1ml，觀察14日，應不出現(xiàn)由疫苗引起的任何局部和全身不良反應。
【效力檢驗】 
1  雞新城疫部分  采用血清學方法進行檢驗，結果不符合規(guī)定時，可采用免疫攻毒法進行檢驗。
（1）血清學方法  用30～60日齡SPF雞15只，10只各頸部皮下或肌肉注射疫苗20μl，另5只作對照。接種后21～28日，每只雞分別采血，分離血清，按現(xiàn)行《中國獸藥典》方法進行HI抗體效價測定。免疫組HI抗體效價的幾何平均值應不低于1:16 ，對照組HI抗體效價均應不高于1:4。
（2）免疫攻毒法  用30～60日齡SPF雞15只，10只各皮下或肌肉注射疫苗20μl，另5只作對照。接種后21～28日，每只雞分別肌肉注射雞新城疫病毒北京株強毒（CVCC AV1611株）10^5.0ELD₅₀，觀察14日。對照組應全部死亡，免疫組應至少保護7只。
2  雞傳染性支氣管炎部分  用14～42日齡SPF雞10只，各點眼、滴鼻接種傳染性支氣管炎活疫苗（H120株）1羽份（0.05ml）。接種后21日，分別采血，分離血清，再肌肉接種三聯(lián)滅活疫苗0.3ml，二免后21～28日再分別采血，分離血清。將兩次血清分別測HI效價（見附注1）。二免血清的HI效價幾何平均值應比首免血清HI效價幾何平均值高3倍以上。
3  H9亞型禽流感部分   血清學方法和免疫攻毒方法，二者任擇其一。
（1）  血清學方法  用28～35日齡SPF雞15只，10只各皮下或肌肉注射疫苗0.3ml，另5只作對照。接種后21日，每只雞分別采血，分離血清，測定HI抗體效價（見附注2）。免疫組HI抗體效價的幾何平均值應不低于1:64，對照組HI抗體效價均應不高于1:4。
（2） 免疫攻毒法  將上述免疫雞和對照雞，用1:10稀釋的禽流感病毒（H9亞型）L株進行靜脈注射，每只雞0.2ml（約含2×10^6.0EID₅₀）。攻毒后第5日，采集每只雞的泄殖腔拭子，經(jīng)處理后，分別經(jīng)尿囊腔接種9～11日齡SPF雞胚5個，每胚0.2ml，孵育觀察5日，無論死胚、活胚均應測定雞胚液血凝價，每個拭子樣品接種的5個雞胚中只要有1個雞胚的雞胚液的血凝價不低于1:16（微量法），即可判為病毒分離陽性。對病毒分離陰性的樣品，應盲傳一次后再進行判定。免疫組應至少有9只雞為病毒分離陰性，對照組應至少4只雞病毒分離陽性。
【甲醛和汞類防腐劑殘留量測定】  分別按現(xiàn)行《中國獸藥典》附錄行測定，應符合獸用生物制品檢驗的一般規(guī)定。
【規(guī)格】  （1） 100ml／瓶  （2） 250ml／瓶  （3） 500ml／瓶
【貯藏與有效期】  2～8℃保存，有效期為12個月。
 
附注
1  傳染性支氣管炎M41株血凝抑制試驗抗原、陽性血清質(zhì)量標準及血凝抑制試驗操作程序
1.1  雞傳染性支氣管炎血凝抑制試驗抗原質(zhì)量標準
本品系用雞傳染性支氣管炎病毒M41株制備的血凝抑制抗原。因目前國內(nèi)無商品化的IB-HI抗原，暫采用國際通用的進口IB-HI抗原，所用抗原應達到如下標準：
【性狀】  微黃色疏松團塊，加稀釋液后迅速溶解。
【效價測定】  按標識體積稀釋后，對1%雞紅細胞凝集價應不低于1:128。
【特異性】  抗原與傳染性支氣管炎M41株陽性血清呈陽性反應（應不低于1:256），與陰性血清、禽流感陽性血清、雞新城疫陽性血清、減蛋綜合征陽性血清均為陰性反應（應不高于1:8）。
【作用與用途】  用于檢測傳染性支氣管炎（Massachusetts血清型）抗體的紅細胞凝集抑制試驗。
【貯藏與有效期】  2～8℃保存，有效期為120個月。
【規(guī)格】  1ml/瓶
1.2  雞傳染性支氣管炎血凝抑制試驗陽性血清質(zhì)量標準
【性狀】  微黃色或淡紅色疏松團塊，加稀釋液后迅速溶解。
【效價測定】  按標識體積稀釋后，HI抗體效價應不低于1:256。
【特異性檢驗】  陽性血清與傳染性支氣管炎M41株抗原應呈陽性反應(應不低于1:256)，與禽流感、雞新城疫、減蛋綜合征抗原應為陰性反應（應不高于1:4）。
【作用與用途】  用于傳染性支氣管炎的紅細胞凝集抑制試驗對照。
【貯藏與有效期】  2～8℃保存，有效期為60個月。
【規(guī)格】  1ml/瓶
1.3  雞傳染性支氣管炎血凝抑制試驗操作方法
1.3.1  雞傳染性支氣管炎HI抗原工作液配制
1.3.1.1  雞傳染性支氣管炎HI抗原血凝價測定  取96孔V型微量反應板1塊，每孔加25μl PBS（0.01mol/L，pH值為7.0～7.4），第一排加25μl抗原，并做2～4個重復孔，然后將抗原進行2倍系列稀釋，稀釋后每孔再加入25μl PBS，最后再加入1%雞紅細胞懸液25μl，用微量振蕩器混勻，2～8℃靜置40分鐘判定結果，以使紅細胞100%凝集的抗原最高稀釋倍數(shù)作為判定終點。
1.3.1.2  雞傳染性支氣管炎HI抗原工作液配制（4HA單位抗原的配制）  根據(jù)測定的HI抗原HA效價，用PBS配制4HA單位抗原。將配制好的4HA單位抗原用PBS稀釋，使其稀釋度為1∶2、1∶3、1∶4、1∶5、1∶6、1∶7。在每一稀釋度的25μl抗原中加25μl PBS，再加入1%雞紅細胞懸液25μl，混勻，2～8℃靜置40分鐘，判定結果。如果1∶4稀釋為紅
細胞100%凝集終點，表明配制的是4HA單位抗原；如果紅細胞100%凝集終點是1∶5或1∶6，表明配制的4HA單位抗原實際上是高于4個單位；如果紅細胞100%凝集終點是1∶2或1∶3，表明配制的4HA單位抗原實際上是低于4個單位。應根據(jù)檢驗結果適當調(diào)整，使抗原工作液為4HA單位。
1.3.2  血凝抑制試驗（HI）
1.3.2.1  取96孔V型微量反應板，每孔加25μl PBS。
1.3.2.2  分別吸取25μl待檢血清，加至每塊板的第一排各相應孔內(nèi)，并在每塊板上設標準陽性血清和陰性血清對照，然后作2倍系列稀釋。
1.3.2.3  分別向各孔中加入含4HA單位的抗原25μl，2～8℃靜置60分鐘。
1.3.2.4  每孔中加入1%（V/V）雞紅細胞懸液25μl，輕輕混勻，2～8℃靜置40分鐘。
1.3.2.5  結果判定  將反應板傾斜，凡血清反應孔與紅細胞對照孔中紅細胞以同樣速度從孔底流淌者判為血凝抑制。當陰性血清HI效價不高于1:8、陽性血清HI效價與規(guī)定效價相比誤差不高于1個滴度時，試驗方可成立。以完全抑制4HA單位抗原的血清最高稀釋度作為HI效價。
2  H9亞型禽流感血凝抑制試驗抗原、陽性血清質(zhì)量標準及血凝抑制試驗操作程序
2.1  H9亞型禽流感血凝抑制試驗抗原質(zhì)量標準
【性狀】  微黃色，海綿狀疏松團塊，易與瓶壁脫離，加稀釋液后迅速溶解。
【無菌檢驗】  按現(xiàn)行《中國獸藥典》附錄方法進行，應無菌生長。
【效價測定】  按標識體積稀釋后，對1%雞紅細胞凝集價應不低于1:1024。
【特異性】  抗原與AI(H9)陽性血清為陽性反應（HI應不低于1:256），與陰性血清、ND陽性血清、禽流感（H5、H7）陽性血清、減蛋綜合征（EDS）陽性血清均為陰性反應（HI應不高于1:4）。
【敏感性檢驗】  對禽流感陽性血清為陽性反應（HI應不低于1:256），對SPF雞血清為陰性反應（HI應不高于1:4）。
【剩余水分測定】  按現(xiàn)行《中國獸藥典》附錄方法進行，應符合規(guī)定。
【真空度測定】  按現(xiàn)行《中國獸藥典》附錄方法進行，應符合規(guī)定。
【作用與用途】  用于檢測H9亞型禽流感抗體的紅細胞凝集抑制試驗。
【貯藏與有效期】  2～8℃保存，有效期為12個月。
【規(guī)格】  （1） 1ml/瓶  （2） 2ml/瓶
2.2  H9亞型禽流感血凝抑制試驗陽性血清質(zhì)量標準
【性狀】  微黃色，海綿狀疏松團塊，易與瓶壁脫離，加稀釋液后迅速溶解。
【無菌檢驗】  按現(xiàn)行《中國獸藥典》附錄方法進行檢驗，應無菌生長。
【效價測定】  按標識體積稀釋后，HI抗體效價應不低于1:256。
【特異性檢驗】  陽性血清與AI（H9）抗原應呈陽性反應（應不低于1:256），與EDS、ND、AI（H5、H7）抗原應呈陰性反應（應不高于1:4）。
【剩余水分測定】  按現(xiàn)行《中國獸藥典》附錄方法進行，應符合規(guī)定。
【真空度測定】  按現(xiàn)行《中國獸藥典》附錄方法進行，應符合規(guī)定。
【作用與用途】  用于H9亞型禽流感紅細胞凝集抑制試驗對照。
【貯藏與有效期】  2～8℃保存，有效期為12個月。
【規(guī)格】  （1） 1ml/瓶  （2） 2ml/瓶
2.3  H9亞型禽流感血凝抑制試驗操作方法
2.3.1  H9亞型禽流感HI抗原工作液配制
2.3.1.1  H9亞型禽流感HI抗原血凝價測定  取96孔V型微量反應板1塊，每孔加25μl PBS（0.01mol/L，pH值為7.0～7.4），第一排加25μl抗原，并做2～4個重復孔，然后將抗原進行2倍系列稀釋，稀釋后每孔再加入25μl PBS，最后再加入1%雞紅細胞懸液25μl，用微量振蕩器混勻，室溫（約20℃）靜置20～40分鐘或2～8℃靜置40～60分鐘判定結果，以使紅細胞100%凝集的抗原最高稀釋倍數(shù)作為判定終點。
2.3.1.2  H9亞型禽流感HI抗原工作液配制（4HAU抗原的配制）  根據(jù)測定的HI抗原HA效價，用PBS配制4HA單位抗原。將配制好的4HA單位抗原用PBS稀釋，使其稀釋度為1∶2、1∶3、1∶4、1∶5、1∶6、1∶7。在每一稀釋度的25μl抗原中加25μl PBS，再加入1%雞紅細胞懸液25μl，混勻，2～8℃靜置40分鐘，判定結果。如果1∶4稀釋為紅細胞100%凝集終點，表明配制的是4HA單位抗原；如果紅細胞100%凝集終點是1∶5或1∶6，表明配制的4HA單位抗原實際上是高于4個單位；如果紅細胞100%凝集終點是1∶2或1∶3，表明配制的4HA單位抗原實際上是低于4個單位。應根據(jù)檢驗結果適當調(diào)整，使抗原工作液為4HA單位。
2.3.2  血凝抑制試驗（HI）
2.3.2.1  取96孔V型微量反應板，每孔加25μl PBS。
2.3.2.2  分別吸取25μl待檢血清，加至每塊板的第一排各相應孔內(nèi)，并在每塊板上設標準陽性血清和陰性血清對照，然后作2倍系列稀釋。
2.3.2.3  分別向各孔中加入含4HA單位的抗原25μl，室溫（約20℃）靜置40分鐘或2～8℃靜置60分鐘。
2.3.2.4  每孔中加入1%（V/V）雞紅細胞懸液25μl，輕輕混勻，室溫（約20℃）靜置20～40分鐘或2～8℃靜置40～60分鐘。
2.3.2.5  結果判定  將反應板傾斜，凡血清反應孔與紅細胞對照孔中紅細胞以同樣速度從孔底流淌者判為血凝抑制。當陰性血清HI效價不高于1:4、陽性血清HI效價與規(guī)定效價相比誤差不高于1個滴度時，試驗方可成立。以完全抑制4HA單位抗原的血清最高稀釋度作為HI效價。
 
（二）雞新城疫、傳染性支氣管炎、禽流感（H9亞型）三聯(lián)滅活疫苗（La Sota株+M41株+L株）說明書
 
【獸藥名稱】                                                              獸用
通用名  雞新城疫、傳染性支氣管炎、禽流感（H9亞型）三聯(lián)滅活疫苗（La Sota株+M41株+L株）
商品名  無
    英文名  Newcastle Disease,Infectious Bronchitis and Avain Influenza （Subtype H9 ） Vaccine,Inactivated（Strain La Sota + Strain M41 + Strain L)
漢語拼音  Jixinchengyi、Chuanranxingzhiqiguanyan、qinliugan（H9 yaxing） Sanlianmiehuoyimiao（La Sota zhu+M41 zhu+L zhu)
【主要成分與含量】  疫苗中含有滅活的雞新城疫病毒La Sota株，滅活前的病毒含量≥10^8.5EID₅₀/0.1ml；雞傳染性支氣管炎病毒M41株，滅活前的病毒含量≥10^7.0EID₅₀/0.1ml；禽流感病毒（H9N2亞型）L株，滅活前的病毒含量≥10^7.5EID₅₀/0.1ml。
【性狀】  乳白色乳劑，劑型為油包水型。
【作用與用途】  用于預防雞新城疫、傳染性支氣管炎和H9亞型禽流感病毒引起的禽流感。接種后21日產(chǎn)生免疫力。
【用法與用量】  肌肉或頸部皮下注射。雛雞，在7～14日齡時首免，每只0.3ml， 21日齡雛雞免疫，每只0.5ml,免疫期為3個月；母雞在開產(chǎn)前14～21日免疫，每只0.5ml，免疫期為6個月。
【不良反應】  無。
【注意事項】  （1） 本品用于接種健康雞，體質(zhì)瘦弱、患有其他疾病的雞，禁止使用。
（2） 使用前應仔細檢查 ，如發(fā)現(xiàn)包裝瓶破裂、沒有標簽、疫苗中混有雜質(zhì)、疫苗油相和水相嚴重分層等情況，均不能使用。
（3） 使用前，應先使疫苗恢復到常溫，并充分搖勻。
（4） 疫苗包裝啟封后要防止污染，限2小時內(nèi)用完。
（5） 本品不能凍結。
（6） 注射本品用的針頭、注射器等用具，用前需經(jīng)高壓或煮沸消毒 。
（7） 本品應與雞新城疫、傳染性支氣管炎活疫苗結合使用，以提高細胞免疫與粘膜免疫。
【規(guī)格】  （1）100ml/瓶  （2）250ml/瓶  （3）500ml/瓶
【包裝】  （1）120瓶/箱  （2）40瓶/箱  （3）20瓶/箱
【貯藏與有效期】  2～8℃下保存，有效期為12個月。
【生產(chǎn)企業(yè)】
僅在獸醫(yī)指導下使用
 
（三）雞新城疫、傳染性支氣管炎、禽流感（H9亞型）三聯(lián)滅活疫苗（La Sota株+M41株+L株）內(nèi)包裝標簽
 
                                                                                 獸用
雞新城疫、傳染性支氣管炎、禽流感（H9亞型）三聯(lián)滅活疫苗
（La Sota株+M41株+L株）
 
100（250、500）ml/瓶                               生產(chǎn)日期：
生產(chǎn)批號：
有效期至：
 
【作用與用途】  用于預防雞新城疫、傳染性支氣管炎和H9亞型禽流感病毒引起的禽流感。接種后21日產(chǎn)生免疫力。
【用法與用量】  肌肉或頸部皮下注射。雛雞，在7～14日齡時首免，每只0.3ml， 21日齡雛雞免疫，每只0.5ml,免疫期為3個月；母雞在開產(chǎn)前14～21日免疫，每只0.5ml，免疫期為6個月。
【貯藏與有效期】  2～8℃保存，有效期為12個月。
【批準文號】 
【生產(chǎn)企業(yè)】 
僅在獸醫(yī)指導下使用